Diferenciando Bacterias Gram Positivo (+) y Gram Negativo (-) Mediante Tinción de Gram

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Pensemos en un día normal de Juan trabajando en el laboratorio; él se encuentra analizando bacterias con el fin de diferenciarlas, para ello, realiza la tinción de Gram. Sin embargo, no es capaz de identificar cuáles son Gram + y Gram −; no recuerda que las bacterias que tienen mayor cantidad de peptidoglicano son Gram + y se tiñen de violeta, debido a que este colorante queda inmerso entre el peptidoglicano; al contrario de las bacterias Gram −, que tienen un menor contenido de éste (el cristal violeta no es el colorante que predomina en este tipo de bacterias), por lo tanto, se tiñen con safranina.



Tinción de Gram positiva y negativa en muestra de laboratorio

Gram + y Gram −

Identificar los componentes de la pared celular de las bacterias para clasificarlas en Gram positivo y Gram negativo, a partir de la técnica de tinción de Gram, con el fin de diferenciarlas.

¿Sabes cómo está constituida la pared celular de las bacterias?


La pared celular es una estructura compleja y semirrígida, responsable de la configuración de la célula; su principal función consiste en evitar la ruptura de la célula bacteriana cuando la presión hidrostática intracelular es mayor que la presión hidrostática extracelular. Desde una perspectiva clínica, la pared celular es importante porque contribuye a la virulencia de algunas especies de bacterias; y es el sitio de acción de algunos antibióticos.

Partes de la pared celular: peptidoglucano

Pared celular





Conociendo la pared celular de las bacterias Gram +


La pared celular de las bacterias Gram + está compuesta por varias capas de peptidoglucano, que conforman una estructura gruesa y rígida; éste es un elemento clave para la estructura, la replicación y la supervivencia de la célula en las condiciones normalmente hostiles en las que proliferan las bacterias.

Además, la pared celular de las bacterias Gram + contiene ácidos teicoicos, que están compuestos, principalmente, por un alcohol (glicerol o ribitol) y fosfato. Existen dos clases de ácidos teicoicos en la pared celular de las bacterias Gram +:

Partes de la pared celular gram positiva
Gram positiva

Y las bacterias Gram −


La estructura de la pared celular de las bacterias Gram − es más compleja, desde el punto de vista estructural y químico. Está conformada por la membrana citoplásmica y por fuera encontramos una delgada capa de peptidoglucano (que representa entre un 5 % y un 10 % del peso de la pared celular).

En la parte externa de la capa de peptidoglucano se encuentra la membrana externa, la cual sólo se encuentra en las bacterias Gram −.



Partes de la pared celular de bacterias Gram negativas

(s. f.) (s. a.). Gram negativas [imagen]. Tomado de https://curiosoando.com/wp-content/uploads/2015/01/pared_celular_bacteria_gram_negativa.png



El espacio periplásmico es la zona comprendida entre la superficie externa de la membrana citoplásmica y la superficie interna de la membrana externa. En este espacio se encuentran diversas enzimas hidrolíticas, muy importantes para la degradación y metabolización de las macromoléculas de gran tamaño.

La membrana externa está compuesta por una bicapa, cuya hoja interna tiene una composición similar a la de la membrana celular; la hoja externa contiene constituyentes diferentes dentro de los cuales encontramos a los lipopolisacáridos. Posee conductos especiales formados por proteínas denominadas porinas, que permiten la difusión pasiva de compuestos hidrofílicos de bajo peso molecular, como azúcares, aminoácidos y ciertos iones.

Comparación entre bacterias Gram + y Gram −

En la siguiente tabla se te muestran las principales diferencias entre las bacterias Gram + y Gram −:

Morales, N. (2017). Comparación de bacterias Gram + y Gram −.

Actividad 1. Identificando componentes de las bacterias Gram + y Gram −

Es importante conocer la morfología y estructura de las bacterias Gram + y Gram −, una de las diferencias fundamentales es la pared celular.


¿Qué es la tinción de Gram?


Ahora que ya conoces la estructura de la pared celular de las bacterias, veamos el proceso que se utiliza en el laboratorio para identificarlas en positivas y negativas:

Por medio de la tinción de Gram podemos clasificar a las bacterias en positivas y negativas; la identificación se basa en diferencias de la estructura de la pared celular y en la forma en que reacciona frente a diversos reactivos que se utilizan durante la tinción.

Y al finalizar este proceso las bacterias Gram + se observan de color azul intenso o violeta; mientras que las bacterias Gram − se observarán de color rojo o rosado. Cuando realices la tinción de Gram recuerda:

Actividad 2. Reconociendo bacterias Gram + y Gram −

Por medio de la tinción de Gram podemos clasificar a las bacterias en positivas y negativas; la identificación se basa en diferencias de la estructura de la pared celular; y en la forma en que reacciona frente a diversos reactivos que se utilizan durante la tinción.



Autoevaluación. Y ahora ¿ya sabes realizar una tinción de Gram?

La tinción de Gram es una técnica de laboratorio que permite la evaluación rápida de bacterias, es importante que ubiques cuales son los pasos que debes seguir para realizarla correctamente.


Fuentes de información

Básicas

Murray, P., Rosenthal, K., y Pfaller, M. (2015). Microbiología médica. Brasil: Elsevier.

Tortora, G., Funke, B., y Case, C. (2007). Introducción a la Microbiología. México: Médica Panamericana.



Complementarias


Brooks, G. (2011). Jawetz, Melnick y Adelberg: microbiología médica. México: McGraw-Hill.

MacFaddin, J. (2003). Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de importancia clínica. México: Médica Panamericana.


Cómo citar

Morales, N. (2018). Diferenciando Bacterias Gram Positivo (+) y Gram Negativo (-) Mediante Tinción de Gram. Unidades de Apoyo para el Aprendizaje. CUAED/FES Iztacala-UNAM. Consultado el (fecha) de (vínculo)